وتشمل طريقة مقطع البارافين أخذ العينات، والتثبيت، والغسيل والتجفيف، والشفافية، وغمس الشمع، والتغليف، والقسم والترقعة، وإزالة الشمع، والصباغة، والتجفيف، والشفافية، والختم وخطوات أخرى.

ارسم المواد
وينبغي اختيار مصادر وقطع المواد وفقا للاحتياجات. فعلى سبيل المثال، يختار الانقسام الفتيلي للخلايا النباتية أساسا رأس جذر البصل، ويكون انقسام الخلية سريعا وسهل القطع ؛ الحدود الفصوية لكبد الخنزير واضحة ومحددة ؛ القوقعة إلى الأذن الداخلية للخنزير الغيني من السهل تحديد موقعها وتقشيرها. يجب أن تكون المادة طازجة. إذا تم استخدامه لفترة طويلة، فإن البروتين سوف يتحلل ويتحلل، مما يؤدي إلى الانحلال الذاتي للخلايا وتكاثر البكتيريا، ولكنه لا يمكن أن يعكس البنية المورفولوجية للأنسجة الحية.

التثبيت
تشريب مادة جديدة مقطعة إلى قطع صغيرة بمحلول كيميائي مناسب، المثبت، بسرعة تخثر أو ترسيب مكونات المادة من الخلايا والأنسجة، إنهاء جميع العمليات الأيضية في الخلايا، ومنع التحلل الذاتي للخلايا أو التغييرات في الأنسجة، والحفاظ على أكبر قدر ممكن من بنية الأنسجة كما كان في الجسم الحي. يعمل التثبيت على تصلب الأنسجة، مما يسهل عملية التقسيم، كما أن له تأثير غمر متذبذب، مما يسهل تلوين الأنسجة. هناك العديد من أنواع المثبتات، وتختلف آثارها على درجة تصلب وانكماش الأنسجة، وكذلك على البروتينات والدهون والسكريات وغيرها من المواد داخل الأنسجة. على سبيل المثال، يمكن للكحول النقي أن يصلح السكر الكبدي ويذيب الدهون، ويمكن للفورمالديهايد أن يصلح الأنسجة العامة، ولكن يذيب السكر الكبدي والصباغ. يمكن تقسيم التثبيت إلى تثبيت مفرد وتثبيت مختلط. يحتوي الأول على الفورمالدهيد (الأسيتالدهيد، الفورمالين)، والكحول، وحامض الخليك أو حامض الخليك الثلجي، وحامض الزئبق، وحامض الأوزميوم (رباعي أكسيد الأوزميوم)، وثنائي كرومات البوتاسيوم، وحامض البكريك، وما إلى ذلك، ولا يمكن تثبيت مادة مثبتة واحدة في خلايا جميع المكونات ؛ يمكن أن يكون المثبت المختلط مكملاً لعيوب المثبت المختلط الشائع الاستخدام، محلول بوان، محلول زنكر، سائل FAA، سائل كارنوي، سائل سوسا (انظر الصيغة الفنية ذات الصلة). (للاطلاع على الصيغ، انظر الكتب التقنية ذات الصلة). ولذلك، ينبغي اختيار المثبت المناسب وفقا للمحتوى الذي سيتم عرضه. 10 ٪ فورمالين (4 ٪ فورمالديهايد) أو 10 ٪ فورمالين مخزن للفوسفات هو المثبت بشكل روتيني يستخدم لأقسام علم الأمراض، ليس فقط لتلوين الهيماتوكسين -يوزين الروتيني، ولكن أيضا لتلوين أقسام أخرى ذات صلة بعلم الأنسجة. وعادة ما تكون كمية التثبيت حوالي 20 مرة من حجم كتلة المادة، ويمكن أن تتراوح مدة التثبيت، اعتمادًا على حجم كتلة المادة وفكوها وكذلك معدل اختراق مادة التثبيت، من ساعة إلى عدة أيام، عادة من ساعة إلى 24 ساعة.

الغسيل والتجفيف
يجب إزالة مواد الأنسجة الثابتة من الأنسجة لإزالة المثبت والرواسب البلورية التي تبقى في الأنسجة، وإلا ستتأثر نتائج التلوين في وقت لاحق. وتسمى هذه الخطوة بالغسيل، ويتم ذلك في الغالب عن طريق الشطف بالماء الجاري ؛ للتثبيت بمركب تثبيت يحتوي على حمض البكريك، يلزم غسل عدة مرات بالكحول ؛ للتثبيت بمزيج من الكحول أو الكحول، لا ضرورة للغسيل ويمكن إجراء التجفاف مباشرة. بعد أن يكون تثبيت أو غسل النسيج ممتلئاً بالماء، إذا لم تقم بإزالة الماء، لا يمكنك القيام بالمعالجة الشفافة والشفافة في وقت لاحق، والسبب هو أن معظم العامل الشفاف هو البنزين، لا يمكن أن يذوب البنزين والبارافين في الماء، لا يمكن إزالة الماء، لا يمكن غمر البنزين. الكحول هو عامل تجفيف شائع الاستخدام، والذي يمكن خلطه مع كل من مرحلة الماء والعامل الشفاف. من أجل الحد من التقلص الحاد للمادة النسيجية، يجب استخدامها من تركيز منخفض إلى تركيز مرتفع لزيادة تنفيذ، عادة من 30 ٪ أو 50 ٪ كحول لبدء، إلى 70 ٪ و 85 ٪ و 95 ٪ حتى الكحول النقي (الإيثانول اللامائي)، في كل مرة لمدة 1 إلى عدة ساعات، مثل ما لا يمكن تنفيذه في الوقت المناسب على جميع مستويات الجفاف، يمكن وضع المادة في الكحول بنسبة 70 ٪ لتوفير، بسبب التركيز العالي للكحول من السهل جعل الأنسجة تنكمش وتتصلب، لا يجب التعامل معها لفترة طويلة. ويمكن أيضاً استخدام ن -بيوتانول، وثلاثي البيوتانول، والأسيتون والديوكسين كعوامل لتجفيف المياه.

شفاف
والكحول النقي ليس قابلا للذوبان في البارافين، لذلك من الضروري استبدال الكحول في النسيج بمادة متذبذبة في كل من الكحول والبارافين. كتلة المادة في هذا النوع من سائل التشريب المتوسط، تظهر شفافة، هذا السائل يسمى عامل شفاف، عملية تشريب عامل شفاف تسمى شفافة. العامل الشفاف الشائع الاستخدام هو الزيلين، البنزين، الكلوروفورم، ن -بوتانول، إلخ، وجميع أنواع العامل الشفاف هي مذيب البارافين. عادة ما تكون المنظمة شحيحة